Plāno slāņu hromatogrāfija ir ķīmiskās analīzes metode, kuras pamatā ir sorbenta slāņa, kura biezums ir 0,1-0,5 mm, izmantošana kā stacionāra fāze. TLC metodi var izmantot dažādās jomās, un tā ļauj noteikt visdažādākos ķīmiskos savienojumus.
Metodes princips
Plāno slāņu hromatogrāfijas metode radās no papīra hromatogrāfijas, un pirmie eksperimenti tika veikti 19. gadsimta 80. gados. Aktīvi izmantot šo analīzi sāka tikai pēc 1938. gada.
TLC paņēmiens ietver kustīgu fāzi (eluentu), stacionāru fāzi (sorbentu) un analītu. Stacionārā fāze tiek uzklāta un fiksēta uz īpašas plāksnes. Plāksni var izgatavot no stikla, alumīnija vai plastmasas - tie ir atkārtoti izmantojami substrāti, kas pēc katras lietošanas reizes rūpīgi jānomazgā, jāizžāvē un jāsagatavo sorbenta uzklāšanai. Ir iespējams izmantot arī papīra plāksnes, kuras pēc lietošanas tiek iznīcinātas.
Silikagelu visbiežāk izmanto kā stacionāro fāzi, taču ir iespējams izmantot citus sorbentus, piemēram, alumīnija oksīdu. Lietojot to vai citu sorbentu, ir stingri jāievēro tehnoloģija, lai rezultāts būtu precīzs, piemēram, tāpēc, ka silikagels var dot nepareizu rezultātu, ja laboratorijas gaiss ir pārāk mitrs.
Kā kustīgā fāze tiek izmantoti šķīdinātāji, piemēram, ūdens, etiķskābe, etanols, acetons, benzols. Šķīdinātāja izvēle ir jāuzņemas atbildīgi, jo hromatogrāfijas rezultāts ir tieši atkarīgs no tā īpašībām (viskozitāte, blīvums, tīrība). Katram analizētajam paraugam izvēlas atsevišķu šķīdinātāju.
Analīze
Paraugs jāatšķaida šķīdinātājā. Ja pilnīga izšķīšana nenotiek un paliek pārāk daudz piemaisījumu, paraugu var notīrīt, ekstrahējot.
Paraugu uz plāksnes var uzlikt automātiski vai manuāli. Automātiskajā uzklāšanā tiek izmantota mikrosmidzināšanas metode, kurā katru paraugu izsmidzina uz attiecīgā substrāta laukuma. Manuālai lietošanai tiek izmantota mikropipete. Katram paraugam uz plāksnes ir uzliktas zīmuļu zīmes. Katrs paraugs ar kapilāru tiek uzklāts uz plāksnes vienā līnijā pietiekamā attālumā no atzīmēm, lai nereaģētu ar svina oglekli.
Plati ievieto traukā, kura apakšā izlej eluentu. Balstu ar vienu malu ievieto traukā līdz iezīmētajai līnijai. Kuģis ir cieši noslēgts, lai izvairītos no kustīgās fāzes iztvaikošanas. Kapilāru spēku iedarbībā eluents sāk augt sorbenta slānī. Kad eluents sasniedz noteiktu līmeni, plāksne tiek izņemta no trauka un žāvēta.
Ja vēlamajai vielai nav krāsas, tā uz pamatnes nebūs redzama. Tāpēc tiek veikta vizualizācija - plāksnes apstrāde ar joda tvaikiem vai citām krāsvielām.
Pēc šādas apstrādes rezultāts tiek novērtēts. Uz sorbenta parādās krāsainas dažādas intensitātes zonas. Lai noteiktu vielu (vai vielu grupu), krāsainos laukumus, to lielumu, intensitāti un mobilitāti salīdzina ar atsauces paraugu.
TLC metode tiek plaši izmantota, jo tā ir ātra, lēta, precīza, intuitīva, neprasa sarežģītu aprīkojumu un ir viegli interpretējama.
